咨詢熱線

010-68022247

當前位置:首頁  >  技術文章  >  細胞破碎兩大破碎方法

細胞破碎兩大破碎方法

更新時間:2018-12-26      點擊次數:5438
細胞破碎技術
破碎方法可規納為機械法和非機械法兩大類。
機械法
高壓勻漿破碎法(homogenization)
高壓勻漿器是常用的設備,它由可產生高壓的正向排代泵(positive displacenemt pump)和排出閥(discharge valve)組成,排出閥具有狹窄的小孔,其大小可以調節。細胞漿液通過止逆閥進入泵體內,在高壓下迫使其在排出閥的小孔中高速沖出,并射向撞擊環上,由于突然減壓和高速沖擊,使細胞受到高的液相剪切力而破碎。在操作方式上,可以采用單次通過勻漿器或多次循環通過等方式,也可連續操作。為了控制溫度的升高,可在進口處用干冰調節溫度,使出口溫度調節在20℃左右。在工業規模的細胞破碎中,對于酵母等難破碎的及濃度高或處于生長靜止期的細胞。
振蕩珠擊破碎法 (Skaking Bead)
將等體積的小量組織樣品與高密度的ZircoBeads放入可密封的2ml螺旋蓋微量管中,再加入緩沖液與穩定成份到1.5ml的體積,用6500RPM振湯機高速上下振動8秒,休息8秒,再振動8秒即可。此方法是目前快且一次可處理多樣品的方法。 一臺機器多可以在一天處理2400支樣品。對小量且多樣的人很方便。
高速攪拌珠研磨破碎法(fine grinding)
研磨是常用的一種方法,它將細胞懸浮液與玻璃小珠、石英砂或氧化鋁等研磨劑一起快速攪拌,使細胞獲得破碎。在工業規模的破碎中,常采用高速珠磨機 。
超聲波破碎法(ultrasonication)
超聲波破碎法利用超聲波振蕩器發射的15-25kHz的超聲波探頭處理細胞懸浮液。 超聲波振蕩器有不同的類型,常用的為電聲型,它是由發生器和換能器組成,發生器能產生高頻電流,換能器的作用是把電磁振蕩轉換成機械振動。超聲波振蕩器以可分為槽式和探頭直接插入介質兩種型式。
撞擊破碎法
非機械法
滲透壓沖擊破碎法(osmotic shock)
滲透壓沖擊是較溫和的一種破碎方法,將細胞放在高滲透壓的溶液中(如一定濃度的甘油或蔗糖溶液),由于滲透壓的作用,細胞內水分便向外滲出,細胞發生收縮,當達到平衡后,將介質快速稀釋,或將細胞轉入水或緩沖液中,由于滲透壓的突然變化,胞外的水迅速滲入胞內,引起細胞快速膨脹而破裂。
凍融破碎法(freezing and thawing)
將細胞放在低溫下冷凍(約-15℃),然后在室溫中融化,反覆多次而達到破壁作用。由于冷凍,一方面能使細胞膜的疏水鍵結構破裂,從而增加細胞的親水性能,另一方面胞內水結晶,形成冰晶粒,引起細胞膨脹而破裂。對于細胞壁較脆弱的菌體,可采用此法。
酶溶破碎法(enzyme lysis)
酶解是利用溶解細胞壁的酶處理菌體細胞,使細胞壁受到部分或*破壞后,再利用滲透壓沖擊等方法破壞細胞膜,進一步增大胞內產物的通透性。溶菌酶(lysozyme)適用于革蘭氏陽性菌細胞的分解,應用于革蘭氏陰性菌時,需輔以EDTA使之更有效地作用于細胞壁。 真核細胞的細胞壁不同于原核細胞,需采用不同的酶。
化學破碎法(chemical treatment)
采用化學法處理可以溶解細胞或抽提胞內組分。常用酸、堿、表面活性劑和有機溶劑等化學試劑
去垢劑破碎法(detergents)
主站蜘蛛池模板: 2022国产精品视频| 国产福利vr专区精品| 丰满岳乱妇一区二区三区| 校花被扒开尿口折磨憋尿| 亚洲电影免费看| 男男gay做爽爽免费视频| 麻豆传播媒体app大全免费版官网 麻豆传播媒体免费版官网 | 韩国全部三级伦电影在线播放| 成人片黄网站色大片免费| 久久精品青草社区| 欧美在线观看免费一区视频| 亚洲精品欧美精品日韩精品| 香蕉视频好色先生| 国产精品vⅰdeoXXXX国产| 67pao强力打造67194在线午夜亚洲| 日本一区二区三区在线看| 九色综合狠狠综合久久| 边摸边吃奶边做爽免费视频99| 国产欧美日韩综合精品一区二区| 777奇米视频| 夜鲁鲁鲁夜夜综合视频欧美| 久久大香伊蕉在人线国产h| 毛片a级三毛片免费播放| 偷自拍亚洲视频在线观看99| 精品女同一区二区三区免费站 | tom39你们会回来感谢我的| 性无码专区无码| 中文字幕亚洲一区二区va在线| 日本三级片网站| 久久人人爽人人爽人人片av不 | 久久综合综合久久综合| 波多野结衣免费视频观看| 免费A级毛片无码视频| 青青青国产依人精品视频| 国产成人精品三级在线| 久久6这里只有精品| 国产精品久久国产三级国不卡顿| 一卡2卡3卡4卡免费高清| 成人免费视频软件网站| 中文字幕一区二区三区人妻少妇| 手机看片中文字幕|